Resistência de Neisseria gonorrhoeae a antimicrobianos na prática clínica: como está o Brasil? / Antimicrobials resistance of Neisseria gonorrhoeae in clinical practice: where Brazil stands?

Estima-se que um milhão de infecções sexualmente transmissíveis (IST) sejam adquiridas por dia no mundo, segundo a Organização Mundial da Saúde. Elas podem ser causadas por diversos micro-organismos pelo contato sexual. Embora tratáveis, as infecções, como a clamidiana, sífilis, tricomoníase e gonorreia, são responsáveis por 350 milhões de novos casos de IST anualmente no mundo. A gonorreia é a segunda IST bacteriana mais prevalente no planeta e tem chamado atenção nos últimos anos em decorrência da baixa eficácia em seu tratamento. O agente etiológico é a Neisseria gonorrhoeae. Na maioria das mulheres, a infecção por esse micro-organismo é assintomática, dificultando ainda mais seu diagnóstico e tratamento e, portanto, aumentando o risco de desenvolvimento de suas complicações associadas. Mesmo quando diagnosticada, essa infecção está sujeita a um alto índice de insucesso terapêutico que se deve, principalmente, à grande plasticidade genética da N. gonorrhoeae para aquisição de genes cromossômicos ou plasmidiais de resistência. O aumento da resistência desse micro-organismo a antimicrobianos comumente utilizados no tratamento, como penicilina, tetraciclina e ciprofloxacina, tem sido relatado em diversos países. No Brasil, poucos estudos estão disponíveis, mas em alguns estados já foram relatadas linhagens resistentes à ciprofloxacina. Dessa forma, deve-se ressaltar a importância de novos estudos que visem descrever o perfil da resistência da N. gonorrhoeae a antimicrobianos. Tais achados certamente nortearão a implementação de sistemas de vigilância epidemiológica no país visto que, até o momento, as infecções por N. gonorrhoeae sequer estão incluídas na lista nacional de doenças e agravos de notificação compulsória.(AU)

According to the World Health Organization, approximately one million sexually transmitted infections (STI) are acquired daily in the world. These infections can be caused by several microorganisms via contact. The treatable STI, such as chlamydia, syphilis, trichomoniasis and gonorrhea, account for 350 million new cases of STI each year worldwide. Gonorrhoea is caused by Neisseria gonorrhoeae and is the second most common bacterial STI in the world. It has drawn more attention in the last years due to the low efficacy in its treatment. Most women with this infection are asymptomatic, which makes its diagnosis and treatment troublesome increasing the risk for its associated complications. Even when diagnosed, this infection is subject to a high rate of therapeutic failure mainly due to the great genetic plasticity of N. gonorrhoeae for the acquisition of chromosomal or resistance plasmid enes. Increased resistance of this microorganism to antimicrobials commonly used in treatment such as penicillin, tetracycline and ciprofloxacin has been reported in several countries. In Brazil, few studies are available, but in some states strains resistant to ciprofloxacin were alreadyreported. The refore, it is important to highlight the importance of new studies aimed at describing the resistance profile of N. gonorrhoeae to antimicrobials in Brazil context. These findings will certainly guide the implementation of epidemiological surveillance systems in the country, since until now N. gonorrhoeae infections do not figure into the national list of compulsorily notifiable diseases.(AU)

Prevalence and production of enzymes by Candida isolates from vaginal secretion samples

A candidíase vulvovaginal (VVC) ocupa o segundo lugar entre as vaginites, sendo Candida albicans responsável pela maioria dos episódios sintomáticos de VVC. Entretanto, um fato a ser considerado é o aumento de infecções por espécies de C. não albicans, o que contribui para as elevadas taxas de recidiva e resistência. Os objetivos deste estudo foram isolar Candida spp. de amostras de secreção vaginal, determinar a prevalência das espécies e verificar a produção de enzimashidrolíticas (proteases, fosfolipases, hemolisinas, catalases e gelatinases) nos isolados clínicos. Foram analisadas 144 amostras de pacientes atendidas em um hospital público em São Luís-MA.A produção de enzimas hidrolíticas foi conduzida em triplicata usando-se métodos específicos. A análise estatística foi realizada por meio dos testes c2, Kruskal-Wallis e Student-Newman-Keuh. Apresentaram cultura positiva para Candida spp. 90 pacientes. A principal espécie isolada (43,3por cento) foi Candida parapsilosis e 43 pacientes (47,8por cento) apresentaram manifestações clínicas sugestivas de VVC.al quando em condições apropriadas.

A correlação entre a presença de espécies de Candida e a presença ou ausência de sintomas não foi estatisticamente significante (x igual 3,22 , p igual 0,073). Verificou-se a expressão de enzimas pelos isolados de Candida spp. nas seguintes porcentagens: hemolisinas (80por cento), fosfolipases (8,9por cento), proteinases (17,8por cento), catalases (64,4por cento) e gelatinases (10,0por cento). Diferenças estatisticamentesignificativas foram observadas entre os isolados em relação à expressão de fosfolipases (p igual 0,0005), sendo C. albicans a espécie mais produtora, e de catalases (p igual 0,0045), em que C. parapsilosis e C. albicans foram as espécies com expressão mais elevada. Este estudo mostrou uma predominânciade espécies não albicans em amostras vulvovaginais e a maioria dos isolados revelou-se produtora de hemolisinas e catalases, o que pode contribuir para a virulência das linhagens de Candida e para o desenvolvimento de infecção vaginal quando em condições apropriadas.

Desenvolvimento do abomaso de bovinos no período pré-natal / Development of bovine abomasum in prenatal period

Para esta pesquisa, amostras de abomaso de fetos da raça Nelore (Bos taurus indicus) foram divididos em cinco grupos: 1º – fetos com 9 a 15 semanas (8 a 21cm) de gestação, 2º – fetos com 16 a 22 semanas (23 a 37 cm), 3º – fetos com 23 a 29 semanas (40 a 58 cm), 4º – fetos com 30 a 36 semanas (61 a 77 cm) e 5º – fetos com 37 a 43 semanas (79 a 88 cm). Os cortes histológicos foram corados com Hematoxilina e Eosina, picrossirius e Tricrômico de Mallory e examinados ao microscópio de luz. No feto de 11 cm, observaram-se pregas mucosas largas, vilosidades revestidas por epitélio simples cilíndrico, lâmina própria, tela submucosa, túnica muscular com estratos interno e externo e serosa. Aos 13,5 cm, as vilosidades eram evidentes com formação da lâmina muscular da mucosa. Aos 16,5 cm, houve aumento em número e tamanho das glândulas mucosas. No feto de 26 cm, observou-se aumento das túnicas e ramificações das glândulas. Aos 29 cm, observou-se aumento no tamanho das pregas. Com 37 cm, houve aumento do epitélio glandular, lâmina muscular da mucosa e túnica muscular. Com 42 cm, as glândulas eram profundas com células mucosas e lâmina pró- pria delgada. Concluiu-se que as os valores histomorfométricos da túnica muscular e parede total do abomaso foram crescentes para todos os grupos, com exceção dos grupos 4 e 5 para os quais houve queda dos valores, sem diferença significante e não houve crescimento contínuo para os demais constituintes da parede do abomaso.

For this purpose, samples of Nelore fetus abomasum (Bos taurus indicus) were classified into five groups: 1 – fetuses with 9 to 15 weeks (8 to 21 cm) of gestation, 2 – fetuses with 16 to 22 weeks (23 to 37 cm), 3 – fetuses at 23 to 29 weeks (40 to 58 cm) 4 – fetuses with 30 to 36 weeks (61 to 77 cm) and 5 – fetuses with 37 to 43 weeks (79 to 88 cm). Histologic sections were stained with Hematoxylin and eosin, picrosirius and Mallory’s trichrome methods and examined underlight microscopy. In fetus with 11 cm of length showed deep mucosa, wide folds and villi lined by single cylindrical epithelium, lamina propria, submucosa, muscular sublayers and serosa. Fetus with 13.5 cm, villi were evident and muscular layer of the mucosa was formed. At 16.5 cm, could be seen an increase in mucosa glands size and number. In fetus of 26 cm, showed gastric mucous glands at great number and ramifications. At 29 cm large folds, were observed.At 37 cm, showed glandular epithelium, muscular layer of the mucosa and muscular layer well development. Fetus with 42 cm, showed deep glands with corresponding mucous cells surrounding by thin lamina propria. It was concluded that the histomorphometric values of muscular layer and total abomasum wall were increased for all groups except for groups 4 and 5 which there was a decline of values, without presenting a significant difference and there was no continuous pattern of growth for other components of abomasum wall.

Desenvolvimento do omaso de bovinos da raça Nelore (Bos taurus indicus) durante o período pré-natal / Development of the omasum of Nelore cattle (Bos taurus indicus) during the prenatal period

O desenvolvimento do estômago de mamíferos domésticos é um processo complexo, especialmente em ruminantes. Essa pesquisa analisou o desenvolvimento desse órgão durante o período pré-natal. Foram utilizadas amostras de omaso de fetos da raça Nelore (Bos taurus indicus) divididos em cinco grupos com seis amostras cada: 1º – fetos com 9 a 15 semanas (8 a 21cm) de gestação, 2º – fetos com 16 a 22 semanas (23 a 37cm), 3º – fetos com 23 a 29 semanas (40 a 58cm), 4º – fetos com 30 a 36 semanas (61 a 77cm) e 5º– fetos com 37 a 43 semanas (79 a 88cm). Os cortes histológicos foram corados com Hematoxilina e Eosina e Picrossirius e examinados ao microscópio de luz. No feto de 11 cm, foi observado mucosa com lâminas primárias, secundárias e terciárias uniformes e demais camadas presentes. No feto de 13,5 cm surgiram as lâminas quaternárias, papilas nas lâminas primárias e secundárias e a formação da muscular da mucosa. Aos 28 cm, as papilas estavam em pleno desenvolvimento, assim como as lâminas, principalmente as quaternárias. No feto de 42 cm houve início de queratinização epitelial e, no de 56 cm, estava totalmente queratinizado. No feto de 60 cm, as lâminas possuíam papilas grandes e afiladas no ápice e, aos 65 cm, houve diminuição do epitélio e aumento da camada muscular. O feto de 83 cm apresentou lâminas delgadas, muscular da mucosa discreta e papilas por toda a superfície. Concluiu-se que as lâminas e papilas foram as estruturas que mais apresentaram modificações durante o desenvolvimento fetal.

The development of the stomach of domestic mammals is a complex process, especially in ruminants. The aim of this study was to analyze this organ during prenatal period. Omasum samples of Nelore fetuses (Bos taurus indicus) were divided into five groups of six samples each: 1- fetuses from 9 to 15 weeks (8 to 21cm) of gestation, 2 - fetuses from 16 to 22 weeks (23 to 37cm), 3 - fetuses from 23 to 29 weeks (40 to 58cm), 4 - fetuses from 30 to 36 weeks (61 to 77cm) and 5 - fetuses from 37 to 43 weeks (79 to 88cm). The histological sections were stained with Hematoxylin and Eosin and Picrossirius and examined by light microscopy. In fetuses of 11 cm it was observed mucosa with uniform primary, secondary and tertiary blades and all layers present. The fetus with 13.5 cm presented quaternary blades emergence, papillae on primary and secondary blades and formation of the muscularis mucosae. At 28 cm it were observed papillae in development, as well as the blades, especially the quaternary. In 42 cm fetuses was early epithelial keratinization and at 56 cm it was fully keratinized. In 60 cm fetuses the blades presented large papillae with tapered apex and at 65 cm there was decreased epithelium and increase of the muscle layer. In the fetus of 83 cm it were observed thin sections, discrete muscularis mucosa and papillae over the entire organ surface. It was concluded that the blades and papillae were structures that presented more changes during fetal development.

Classification of capacity of membership isolated from clinical candida spp patterns in different cell arrangements

A adesão às células do hospedeiro é considerada uma propriedade de virulência essencial para o desenvolvimento da candidíase, uma vez que é a etapa inicial do processo infeccioso em mucosa, especialmente em pacientes imunocomprometidos. O presente estudo avaliou a adesão à lamínula de 118 isolados clínicos de Candida de diversos sítios anatômicos e classificou os arranjos celulares em padrões de aderência distintos. Foram estudadas quatro espécies de Candida (C. albicans, C. tropicalis, C. parapsilosis e C. glabrata). Em um total de 93 (79 por cento) isolados foi identificada a propriedade de aderência e, destes, 51 (43,3 por cento) mostraram capacidade fraca de aderência; 25 (21,2 por cento), intensidade moderada e 17 (14,4 por cento), forte. Isolados de C. glabrata mostraram os menores níveis de adesão e os de C. tropicalis, os maiores. Entre os isolados com capacidade de aderir, 44 (47,3 por cento) apresentaram o padrão de aderência localizado, 24 (25,8 por cento) mostraram um padrão agregativo e 9 (9,7 por cento), o tipo pseudo-hifal. Nos isolados de C. parapsilosis, verificou-se maior variabilidade em termos de padrões de adesão às lamínulas. Em síntese, esta pesquisa mostra que os isolados de espécies de Candida não C. albicans foram mais aderentes que os de C. albicans sugerindo maior expressão desta propriedade naquelas amostras...

Classification of adherence ability of clinical isolates of Candida spp in different patterns of cellarrangementsAdhesion has been identified as a potential virulence factor for developing candidiasis, since it isa primary mechanism of infection, especially in immunocompromised patients. The present studyreports on an in vitro adherence assay and the establishment of patterns of adhesion of clinicalisolates of Candida from many different anatomical sites, with the goal of comparing this virulenceproperty among these isolates. Adherence ability was quantified in 118 strains of Candida. Theresults showed that all isolates adhered to coverslips in a species- and strain-dependent mannerwith C. glabrata showing the lowest and C. tropicalis the highest levels of adhesion. From 93(79%) isolates with the ability to adhere, 51 (43.3%) showed weak adherence, 25 (21.2%) moderateadherence and 17 (14.4%), a strong adherence ability. Among the strains with the ability to adhere,44 (47.31%) presented a pattern of localized adherence, 24 (25.8%) showed an aggregative patternand only 9 (9.7%) had a pseudo-hyphal type. It was found that non C. albicans strains were moreadherent than isolates of C. albicans, suggesting higher expression of this property in those species...

Prevalência e produção de exoenzimas por espécies de Candida provenientes da mucosa bucal de pacientes com AIDS e indivíduos hígidos / Prevalence and exoenzyme production by Candida species from the oral mucosa of AIDS patients and healthy individuals

Infecções por leveduras do gênero Candida têm gerado elevados índices de morbidade e mortalidade, longo período de permanência em hospitais, dificuldade e alto custo de tratamento.Indivíduos imunodeprimidos como os portadores da Síndrome da Imunodeficiência Adquirida (Aids) apresentam grande suscetibilidade a desenvolver essas infecções em razão do baixo número de linfócitos T-CD4, menor que 200 cel/mm3. Candida albicans é a espécie mais estudadae está relacionada com os processos de colonização e patogenicidade na boca do homem. Essa característica é decorrente, entre outros fatores, da produção de exoenzimas facilitadoras dainteração do fungo com as células do hospedeiro. Este estudo verificou a produção das exoenzimas proteinase, fosfolipase, gelatinase e hemolisina de amostras bucais de Candida isoladas de 49 pacientes com Aids (grupo teste) e de 26 indivíduos hígidos (grupo controle). C. albicans foi a espécie mais prevalente no grupo teste (59,2por cento) e Candida parapsilosis (53,8por cento) no grupo controle. C. albicans apresentou resultados significativos para a produção de proteinase (ambos os grupos) e fosfolipase no grupo teste. Já as espécies de Candida não albicans (CNA) apresentaram resultadosaltamente significativos para fosfolipase no grupo controle. Em relação às enzimas gelatinase e hemolisina, não foram encontradas diferenças significantes entre C. albicans e espécies CNA. Por fim, não foi encontrada diferença estatística na produção de exoenzimas quando foi comparado o grupo teste com o grupo controle.

Detecção de betalactamases de espectro estendido (ESBL) em isolados de Escherichia coli uropatogênicas (UPECS) oriundos de pacientes da comunidade / Detection of extended spectrum beta-lactamases (ESBLS) in isolates of uropathogenic Escherichia coli (UPECs) from patients in the community

A produção de betalactamases de espectro estendido (ESBL) consiste em um importante mecanismo de resistência aos antimicrobianos betalactâmicos. O vasto uso desses antibióticos no tratamento das infecções do trato urinário (ITU) tem agravado ainda mais esta problemática. As bactérias do tipo UPEC são consideradas as principais responsáveis por este tipo de infecção. Estudos para acompreensão da diversidade dessas enzimas no Brasil são escassos e, além disso, muitos deles são direcionados à pesquisa de isolados de origem hospitalar. Os objetivos do presente estudo foram detectar os genes que codificam as betalactamases TEM, CTX-M e SHV por PCR multiplexe identificar os isolados que as produzem por meio do método do disco aproximação. Do total dos isolados analisados, 12,8por cento apresentaram o fenótipo positivo para ESBL, enquanto 65,8por cento amplificaram sequências homólogas para os genes de betalactamases. Destes, os predominantes foram blaTEM e blaCTX-M, com 42,7por cento e 18,8por cento, respectivamente. Dois isolados não amplificaram para nenhum dos genes em estudo, apesar de terem expressado a enzima no teste fenotípico. Os resultados obtidos neste trabalho ressaltam a necessidade de mais estudos que visem à caracterizaçãomolecular para elucidar a disseminação desse mecanismo de resistência entre bactérias oriundas de pacientes da comunidade.

Prevalência de vaginose bacteriana em pacientes que realizaram bacterioscopia de secreção vaginal em laboratório de saúde pública / Prevalence of bacterial vaginosis in patients who vaginal bacterioscopy implemented in a public health laboratory

JUSTIFICATIVA E OBJETIVOS: Vaginose bacteriana (VB) é caracterizada pela alteração na microflora da vagina, com redução e/ou ausência de espécies de Lactobacillus. É a causa mais comumde infecções vaginais em mulheres na idade reprodutiva e frequentemente está associada a corrimentos vaginais. O objetivo deste estudo foi verificar a prevalência de VB em pacientes ambulatoriais e leucocitose, relacionando com a presença de outros micro-organismos. MÉTODO: Foram analisados 765 laudos provenientes de pacientes ambulatoriais do Laboratório Central de Saúde Pública de São Luís, no período de janeiro de 2006 a março de 2009. RESULTADOS: Foram baseados na bacterioscopia de esfregaços de secreções vaginais corados pelo Gram e no exame direto à fresco para a pesquisa de Candida spp. e Trichomonas vaginalis. Quando analisada a prevalência global de micro-organismos, obteve-se 39% dos casos positivos. Gardnerella vaginallis foi o micro-organismo mais prevalente, seguido de Candida spp., Mobiluncusspp e Trichomonas vaginalis. O número de leucócitos variou, embora a presença de poucos leucócitos tenha sido maisfrequente. CONCLUSÃO: A prevalência de VB nas pacientes atendidas no período estudado foi maior na faixa etária de menores de 20 anos com aproximadamente 39% das amostras positivas para presença de micro-organismos potencialmente patogênicos.

BACKGROUND AND OBJECTIVES: Bacterial vaginosis (BV) is characterized by alterations in the microflora of the vagina,reducing and/or absence of species of Lactobacillus. It is the most common cause of vaginal infections in women of reproductive age and often is associated with vaginal discharge. The aim ofthis study was to assess the prevalence of BV in outpatients and leukocytosis, relating to the presence of other microorganisms. METHOD: There were analyzed 765 cases of Laboratório Central de Saúde Pública de São Luís, during January 2006 to March 2009. RESULTS: Were based in bacterioscopy of vaginal smears coloredby Gram and the wet mount for the research of Candida spp. and Trichomonas vaginalis. The global prevalence of microorganisms was 39%. Gardnerella vaginallis was the most prevalent microorganism, followed by Candida spp., Mobiluncus spp and Trichomonas vaginalis. The number of leukocytes varied, although the leukopenia was more frequent. CONCLUSION: It can be concluded that the prevalence of BV in patients treated during the period studied was higher in theage group younger than 20 years with approximately 39% of samples positive for the presence of potentially pathogenic microorganisms

Comparison of selective agars recommended by method ISO 11290-1 and chromogenic agars for the isolation of Listeria sp. in refrigerated sausages

The aim of this study was to determine the prevalence of Listeria sp. in refrigerated sausages, and to compare the performance of the selective plating media employed in the ISO 11290-1 method (PALCAM and Oxford agars) with chromogenic agars (Chromogenic Listeria agars CM 1080 (OCLA) and CM 1084). The prevalence of Listeria sp. detected was 52.9%, comprising 13.7% L. monocytogenes strains. The efficacy of the four agars for the isolation of L. monocytogenes proved to be satisfactory. Despite differences in composition of the chromogenic media assessed, these disparities did not affect concordance among results. However, PALCAM agar was shown to suppress other microorganisms more effectively, being more applicable for detecting Listeria strains present in lower quantities. Based on these results, the use of PALCAM agar, in combination with a chromogenic media, is recommended for enhanced isolation of atypical Listeria sp. strains in meat products.

Este estudo teve como objetivo a análise da prevalência de Listeria sp. em linguiças resfriadas e a comparação dos meios seletivos utilizados no plaqueamento do método ISO 11290-1 (Ágar PALCAM e Ágar Oxford), e ágares cromogênicos (Ágares Listeria Cromogênico CM 1080 (OCLA) e CM 1084 (ISO)). A frequência de Listeria sp. foi de 52,9%, sendo que destas, 13,7% corresponderam à L. monocytogenes. A eficácia dos quatro ágares para o isolamento de L. monocytogenes demonstrou-se satisfatória. Apesar de haver algumas diferenças nas composições dos meios cromogênicos analisados, estas não pareceram influenciar nas concordâncias entre os resultados expressos. Contudo, o ágar PALCAM mostrou-se mais eficaz na supressão de outros micro-organismos, aumentando, assim, a possibilidade de detecção de espécies de Listeria presentes em número reduzido. Através deste trabalho sugere-se a utilização do ágar PALCAM associado a um meio cromogênico para aumentar a chance de isolamento de cepas atípicas de Listeria sp. em produtos cárneos.

Histomorfometria do corno uterino de gatas (Felis catus) submetidas à ovariosalpingohisterectomia / Histomorphometry of the uterine horn of queens (Felis catus) uterus submitted to ovaryhisterectomy

Dados histomorfométricos foram obtidos de cornos uterinos de gatas nulíparas (n=6), primíparas (n= 6), multíparalterações mais marcantes nas gatas tratadas; as variações morfológicas menos marcantes foram relativas ao diâmetro e epitélio glandulares; a presença de glândulas endometriais dilatadas foi encontrada somente nas gatas tratadas.

Histomorphometric data were obtained from cats uterine horns: either nulliparous (n = 6), primiparous (n = 6), multiparous (n = 6) and treated with contraceptive (n = 6). The material was collected after surgery, fixed in paraformaldehyde and embedded in paraplast® resin to be sliced in a microtome. The obtained sections were stained with hematoxylin -eosin and measured under a light microscope: uterine wall total thickness (μm), endometrium total height, endometrial glands diameter and glandular epithelia height, total myometrium, internal and external myometrium and vascular layer thickness. It was concluded that: 1 -contraceptive use and number of pregnancies altered the uterine structure, 2 -one pregnancy does not appear to affect the uterine lining structures as occurs in multiparous cats, 3 – there was no variation on the evaluated structures between nulliparous and primiparous cats except for inner myometrium, 4 - the total myometrium hight and the endometrium hight showed similar variations except for the contraceptive treated cats group, 5 - the outer myometrium showed marked changes in the treated cats, 6 – the less marked morphological variations were for the endometrial glands diameter and glandular epithelium hight, 7 - the presence of dilated endometrial glands was found only in treated cats.

Diversity and prevalence of airborne fungi isolated from São Luis, Northeast Brazil

Airborne fungi are considerate the main agents related to allergy in patients that suffer from asthma and rinitis. The knowledge about the prevalence of these microorganisms and theis seasonal variation can be useful for human health by improving the diagnosis and treatment of respiratory allergic disease provoked by their inhalation. The present study has isolated and identified airborne funfi from São Luis city investigating their prevalence, biodiversity and seasonal variation. Samples were taken by the Petri plate gravitacional method in six urban areas. A total of 2993 fungal colonies were counted, 67,9% in the dry season and 32,1% in the rainy season. Statistical analysis showed that there are significant diference (p=0,0121) between the averages of spores in dry and rainy periods. Relative humidity, rainfall precipitation and wind speed can have influenced the diversity and concentration of fungal spores presents in the air. Among 24 genera isolated, the most prevalent ones were Aspergillus (38,7)%, Fusarium (13,90%), Curvularia (11,18%) and Penicillium (10,88%), major triggers of allergic process worldwide recognized. The data show the presence of a large number of airborne fungi spores in São Luis and all genera found are opportunistic and they may cause disease in susceptible patients.

Characterization of virulence genes cagA and vacA in Helicobacter Pylori and their prevalence in gastrointestinal disorders

Prevalence of H. pylori infection was determined using cultures of gastric biopsy samples of patients attended at the academic hospital of the Federal University of Paraná, Curitiba, Paraná, Brazil. Molecular methods were used to characterize the cagA and vacA genes from bacterial isolates associated with different diseases presented by patients. Out of a total of 81, forty-two gastric biopsy samples tested were positive for H. pylori, with a prevalence of 51.9 percent. No significant difference was found with regard to the gender (p=0.793) and age (p=0.183) of the patients. Genotype s1m1 vacA gene was found in 67 percent of the cases of peptic ulcer investigated (p=1.0), despite the limited number of patients with this disease (n=3). A correlation between the presence of less virulent strains (s2m2) and reflux esophagitis was found in the majority of the cases (45 percent), but without statistical significance. An association between the prevalence of cagA gene, found in 92 percent of isolates, and peptic ulcer was not observed (p=1.0), suggesting that this gene cannot be considered a specific marker of severity in our environment. The results reinforce the importance of conducting regional studies and the need to characterize H. pylori virulence genes associated with different diseases.

In vitro differential activity of phospholipases and acid proteinases of clinical isolates of Candida / Atividade diferencial in vitro de fosfolipases e proteinases ácidas de isolados clínicos de Candida

INTRODUCTION: Candida yeasts are commensals; however, if the balance of normal flora is disrupted or the immune defenses are compromised, Candida species can cause disease manifestations. Several attributes contribute to the virulence and pathogenicity of Candida, including the production of extracellular hydrolytic enzymes, particularly phospholipase and proteinase. This study aimed to investigate the in vitro activity of phospholipases and acid proteinases in clinical isolates of Candida spp. METHODS: Eighty-two isolates from hospitalized patients collected from various sites of origin were analyzed. Phospholipase production was performed in egg yolk medium and the production of proteinase was verified in a medium containing bovine serum albumin. The study was performed in triplicate. RESULTS: Fifty-six (68.3 percent) of isolates tested were phospholipase positive and 16 (44.4 percent) were positive for proteinase activity. C. tropicalis was the species with the highest number of positive isolates for phospholipase (91.7 percent). Statistically significant differences were observed in relation to production of phospholipases among species (p<0,0001) and among the strains from different sites of origin (p=0.014). Regarding the production of acid protease, the isolates of C. parapsilosis tested presented a larger number of producers (69.2 percent). Among the species analyzed, the percentage of protease producing isolates did not differ statistically (χ2=1.9 p=0.5901 (χ2=1.9 p=0.5901). CONCLUSIONS: The majority of C. non-albicans and all C. albicans isolates were great producers of hydrolytic enzymes and, consequently, might be able to cause infection under favorable conditions.

INTRODUÇÃO: Candida são leveduras comensais, porém, se o equilíbrio da flora normal for interrompido ou as defesas imunitárias estiverem comprometidas, espécies de Candida podem causar manifestações de doença. Vários atributos contribuem na virulência e patogenicidade de Candida, inclusive a produção de enzimas extracelulares hidrolíticas, especialmente fosfolipases e proteinases. O objetivo deste estudo foi verificar a atividade in vitro de fosfolipases e proteinases ácidas em isolados clínicos de Candida spp. MÉTODOS: Oitenta e dois isolados provenientes de pacientes hospitalizados coletados a partir de sítios de origem diversos foram analisados. A produção de fosfolipase foi verificada em meio egg yolk e a de proteinase em meio contendo soro albumina bovina. O estudo foi feito em triplicata. RESULTADOS: Cinquenta e seis (68,3 por cento) dos isolados testados apresentaram atividade de fosfolipase positiva e 16 (44,4 por cento) foram positivos para atividade de proteinase. C. tropicalis foi a espécie que apresentou o maior número de isolados positivos para fosfolipases (91,7 por cento). Diferenças estatisticamente significantes em relação à produção de fosfolipases entre as espécies e entre as cepas provenientes de diferentes sítios de origem foram detectadas. Quanto à produção de proteinases ácidas, os isolados de C. parapsilosis testados foram os maiores produtores (69,2 por cento). Entre as espécies analisadas, a porcentagem de produção de proteinase entre os isolados não diferiu estatisticamente (χ2=1.9 p=0.5901 (χ2=1.9 p=0.5901). CONCLUSÕES: A maioria dos isolados de C. não-albicans, assim como os de C. albicans, foram grandes produtores de enzimas hidrolíticas e, consequentemente, podem ser capazes de causar infecção em condições adequadas.

Anti-Helicobacter pylori activity of plant extracts traditionally used for the treatment of gastrointestinal disorders

The antibacterial activity of plant extracts obtained from Bixa orellana L., Chamomilla recutita L., Ilex paraguariensis A. St.-Hil., Malva sylvestris L., Plantago major L. and Rheum rhaponticum L. has been evaluated against two reference strains and eleven clinical isolates of Helicobacter pylori. All the plant species chosen are used in popular Brazilian cuisine and folk medicine in the treatment of gastrointestinal disorders. Initial screening was made by the disk diffusion test and then minimum inhibitory concentration was determined by the agar dilution method. The results presented in this work demonstrated that among the plant preparations analyzed, B. orellana L., C. recutita L., I. paraguariensis A. St.-Hil. and M. sylvestris L. were capable of inhibiting the in vitro growth of H. pylori.

Avaliação da qualidade microbiológica de águas minerais envasadas / Evaluation of bottled mineral water microbiological quality: population dynamics of Pseudomonas aeruginosa

Com o intuito de monitorar alterações no índice de contaminação durante o armazenamento, foram avaliadas quanto à contaminação por Pseudomonas aeruginosa setenta e cinco amostras, de cinco marcas distintas, de água mineral envasadas em copos ou garrafas plásticas de 500mL e 1500 mL. Os ensaios foram efetuados em dois períodos diferenciados, o primeiro um dia após aquisição das amostras completaram seis meses de armazenamento. Segundo os padrões determinados pela RDC n.275/05 do Ministério da Saúde, 53 por cento dos lotes foram rejeitados. O monitoramento da contaminação durante o armazenamento revelou que, independente da elevação ou redução nas contagens, P aeruginosa foi detectada mesmo após 180 dias de estocagem, confirmando que se trata de micro-organismo que se adapta em ambientes com baixo teor nutricional. O percentual de rejeição das amostras revelou a necessidade de práticas de higiene mais efetivas a serem adotadas durante o envase, garantindo a comercialização de produtos seguros e que atendam aos rigorosos padrões microbiológicos estabelecidos pela legislação brasileira.

Histologia e morfometria em cornos uterinos de cadelas nulíparas, multíparas e tratadas com contraceptivos / Histology and morphometry in uterus horns of nulliparous bitches, multiparous ones and bitches treated with contraceptives

Dados histológicos e morfométricos foram obtidos de útero de cadelas nulíparas (n=6), multíparas (n=6) e de cadelas tratadas com contraceptivo (n=6). Para esse fim foram usadas seis amostras de cornos uterinos, em corte médio, para cada grupo. As mensurações das espessuras da parede uterina, endométrio total, miométrio total, miométrio interno, miométrio externo, estrato vascular e diâmetro das glândulas endometriais normais não foram estatisticamente significantes entre as cadelas multíparas e tratadas, com exceção para a altura do epitélio de glândulas normais. As mensurações das espessuras da parede uterina, endométrio total, miométrio total, miométrio interno, diâmetro das glândulas normais e altura do epitélio glandular foram significantes, comparando cadelas nulíparas com as multíparas e/ou tratadas, com exceção para as espessuras do miométrio externo e estrato vascular. Diante dos resultados obtidos, pode-se concluir que os dados numéricos confirmam que (1) o uso de anticoncepcionais e sucessivas gestações afetam a estrutura uterina em seu total; (2) o miométrio externo e estrato vascular foram as regiões que menos sofreram alterações comparando-se os 3 grupos; (3) as variações morfológicas ocorreram com a mesma intensidade no endométrio e miométrio totais para as cadelas tratadas e multíparas, e (4) a presença de glândulas endometriais dilatadas foi o diferencial encontrado nas cadelas tratadas, pois as mesmas estavam ausentes nas multíparas e nulíparas.

Histological and morphometric data were obtained from uterus of nulliparous bitches (n=6), multiparous ones (n=6), and bitches treated with contraceptive (n=6). Six samples of uterine horns, cut in average for each group. Measurements of the thickness of the uterine wall, total endometrium, total myometrium, internal myometrium, external myometrium, vascular layer and diameter of normal endometrial glands were not statistically significant between the treated and multiparous bitches, except for the height of the epithelium of normal glands. Measurements of thickness of the uterine wall, total endometrium, total myometrium, myometrium internal diameter and height of the glands of normal glandular epithelium were significant, comparing nulliparous with multiparous bitches and/or treated, except for thickness of the myometrium and vascular outer layer. It can be concluded that (1) the use of contraceptives and successive pregnancies affected uterine structures in its full, (2) the vascular layer and external myometrium were the regions with less variation, (3) morphological changes occurred with the same intensity in the total endometrium and myometrium of treated and multiparous bitches; and (4) the presence of dilated endometrial glands was the difference found in the treated bitches, because they were absent in nulliparous and multiparous ones.

Aspectos histológicos e morfométricos dos testículos de gatos domésticos (Felis catus) / Histological and morphometric evaluation of the testes of cats (Felis catus)

Nesta pesquisa foram obtidos dados histológicos e morfométricos comparativos sobre os testículos de gatos, pós-orquiectomia, divididos em dois grupos: Grupo 1, gatos com até 1 ano de idade e Grupo 2, animais acima de 1 ano. Verificou-se que: (1) aos 4 meses de idade os túbulos seminíferos apresentaram-se pouco desenvolvidos e com ausência de luz, epitélio seminífero baixo, células de Sertoli indiferenciadas e tecido intersticial escasso; (2) aos 5 meses os túbulos seminíferos começaram a se diferenciar com aumento do diâmetro e luz tubulares e as demais estruturas permaneceram semelhantes à observação anterior; (3) aos 6-7 meses ocorreu o início da espermatogênese e espermiogênese; as células de Leydig apareceram maiores, poliédricas com citoplasma vacuolizado e núcleo claro, e tecido intersticial esparso com poucos vasos sangüíneos; (4) os animais com 1 ano de idade apresentaram morfologia testicular igual à do animal adulto, com túbulos seminíferos de maior diâmetro, epitélio germinativo alto e luz tubular pequena, as células de Leydig aparecendo poliédricas, com dimensões variadas, citoplasma vacuolizado, núcleo claro e nucléolo evidente, e espaço intertubular seminífero variado com vasos sanguíneos, predominantemente evidentes; (5) no Grupo 1 o diâmetro médio dos túbulos seminíferos foi de 160,58µm e no Grupo 2 foi de 185,94µm, sendo os valores médios significantes entre si; (6) a altura média do epitélio seminífero foi de 49,51µm para o Grupo 1 e de 63,29µm para o Grupo 2, estaticamente significantes; (7) os maiores valores mensurados foram obtidos para os gatos do Grupo 2, por serem gatos adultos e portanto com os órgãos reprodutores funcionais.

This paper deals with a comparative histologic and morphometric study of the testes of domestic cats distributed into two groups: Group 1, cats until 1 year of age, and Group 2, cats over 1 year. It was found that: (1) at 4 months of age the seminiferous tubules were poorly developed, appeared as seminiferous cords without lumen, lined by a low epithelium, and showed undifferentiated Sertoli cells and scarce interstitial tissue; (2) at 5 months the seminiferous tubules began to differentiate with increase in tubular diameter and lumen, the other tubular structures remaining similar to those previous referred; (3) at 6 and 7 months of age spermatocytogenesis began to appear, Leydig cells were large, polyhedral in shape, with vacuolated cytoplasm and clear nuclei, resting on a sparse interstitial tissue with few blood vessels; (4) 1-year-old cats showed testicular histological features of an adult animal, had seminiferous tubules of large diameter and high seminiferous epithelium with small lumen, and Leydig cells of different sizes, with polyhedral shape, vacuolated cytoplasm, clear nuclei and evident nucleoli resting in a sparse interstitial tissue with some blood vessels; (5) in Group 1 the average diameter of the seminiferous tubules was 160.58µm, and 185.94µm in Group 2; (6) the height of the seminiferous epithelium was 49.51µm for Group 1 and 63.29µm for Group 2; (7) the largest measures of the analyzed parameters were found in animals of Group 2, with functional reproductive organs.

Occurrence of listeria monocytogenes in cheese and ice cream produced in the state of Paraná, Brazil / Ocorrência de listeria monocytogenes em queijos e sorvetes produzidos no estado do Paraná, Brasil

The occurrence of Listeria monocytogenes in Brazilian ice cream and in some soft and semi-soft cheeses produced and sold in the State of Paraná, Brazil was evaluated. Ninety samples of cheese and sixty samples of ice creams were analyzed following the guidelines outlined by the official institutes, AOAC and FDA. In the ice cream samples no isolation of Listeria spp. was found. The percentage of these ninety samples of cheeses positive for Listeria spp. was 12.20 percent. Listeria monocytogenes was detected in six (6.70 percent) of the same samples. The presence of Listeria innocua was five (5.50 percent) in the samples analyzed was also observed. According to the results of the work it is possible to presume that there is a potential health risk to the brazilian population, heightened by aging and the increase in immunodepressed. These results indicate the need for the implementation of monitoring of these microorganisms as much by producers as by health inspectors. The results also show that the VIP (visual immunoprecipitation assay) is a viable triage method of contaminated samples for the liberation of products for commercialization, as it is quick, reliable and does not require additional equipment other than that normally found in production labs, while presenting reliable results.

A ocorrência de Listeria monocytogenes em sorvetes e alguns tipos de queijos macios e semi-macios produzidos e vendidos no Estado do Paraná Brasil foram avaliados. Noventa amostras de queijo e sessenta amostras de sorvete foram analisadas seguindo os protocolos da AOAC e FDA. Nas amostras de sorvete, não ocorreu o isolamento de Listeria spp. Foi detectada Listeria spp em 12,20 por cento de amostras de queijo, das quais 6 (6,70 por cento) foram positivas para Listeria monocytogenes. Foi também observada a presença de Listeria innocua em 5 amostras (5,50 por cento) das mesmas amostras. Pelos resultados deste trabalho pode-se pressupor que existe um risco potencial à saúde da população brasileira com o agravante ainda, desta estar envelhecendo e aumentando o número de imunodeprimidos. Os resultados indicam a necessidade de implementação do monitoramento deste microrganismo pelos produtores bem como pela fiscalização. Mostra também que o método VIP é um método viável na triagem de amostras contaminadas para a liberação do produto para a comercialização por ser rápido, confiável e não requerer equipamentos adicionais.

Effects of pentoxifylline on TNF-alpha and lung histopathology in HCL-induced lung injury

OBJECTIVE: To evaluate the effects of pentoxifylline on hydrochloric acid-induced lung lesions in rats subjected to mechanical ventilation. METHODS: Twenty male, adult Wistar-EPM-1 rats were anesthetized and randomly grouped (n=5 animals per group) as follows: control-MV (mechanical ventilation, MV group); bilateral instillation of HCl (HCl group); bilateral instillation of HCl followed by pentoxifylline (50 mg/kg bw) infusion (HCl+PTX group) and pentoxifylline infusion followed by bilateral instillation of HCl (PTX+HCl group). At 20, 30, 90 and 180 min after treatments, the blood partial pressures of CO2 and O2 were measured. The animals were euthanized, and bronchoalveolar lavages were taken to determine the contents of total proteins, corticosteroid and TNF-alpha. Samples of lung tissue were used for histomorphometric studies and determining the wet-to-dry (W/D) lung weight ratio. RESULTS: In the MV group, rats had alveolar septal congestion, and, in the HCl group, a remarkable recruitment of neutrophils and macrophages into the alveoli was noticed; these events were reduced in the animals with PTX+HCl. The partial pressure of oxygen increased in PTX+HCl animals (121±5 mmHg) as compared with the HCl (62±6 mmHg) and HCl+PTX (67±3 mmHg) groups within 30 minutes. TNF-alpha levels in bronchoalveolar lavage were significantly higher in the HCl group (458±50 pg/mL), reduced in the HCl+PTX group (329±45 pg/mL) and lowest in the PTX+HCl group (229±41 pg/mL). The levels of corticosteroid in bronchoalveolar lavage were significantly lower in the HCl (8±1.3 ng/mL) and HCl+PTX group (16±2 ng/mL) and were highest in the PTX+HCl (27±1.9 ng/mL). CONCLUSION: Pretreatment with PTX improves oxygenation, reduces TNF-alpha concentration and increases the concentration of corticosteroid in bronchoalveolar lavage upon lung lesion induced by HCl.

Enrichment methodology to increase the positivity of cultures from body fluids

Isolation and identification of etiological agents found in body fluids can be of critical importance for the recovery of patients suffering from potentially-severe infections, which are often followed by serious sequels. Eighty-two samples of different body fluids were analyzed using two different methods: (1) the conventional culture method (agar plating) and (2) the enrichment culture technique, using the Bact/Alert® blood culture bottle. The number of positive cultures increased on average from 9.7 percent to 23.1 percent with the enrichment culture technique. Pseudomonas aeruginosa, Escherichia coli and Staphylococcus aureus were the most frequently isolated bacteria. The enrichment method could provide a more accurate means the identifying etiological agents.